FC402 BioGold Ar.Qual 化学感受态细胞
产品货号产品名称规格价格FC402-20BioGoldAr.Qual Chemically Competent Cell20×100ul700.00 FC402-5050×10
| 产品货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
| FC402-20 | BioGoldAr.Qual Chemically Competent Cell | 20×100ul | 700.00 |
| FC402-50 | 50×100ul | 1520.00 | |
| FC402-100 | 100×100ul | 2500.00 |
产品规格
Ar.Qual： 100μl/支
pCAMBIA2301（control vector，10ng/μl ) 10μl
保存条件(保质期): -80℃（12个月）
基因型
Agrobacterium rhizogenes (strR,CamR) Ar.Qual Ri (agropine type)
产品说明
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.Qual发根农杆菌菌株含有农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围（玉米,烟草,番茄,柑橘等），同时具有链霉素,氯霉素抗性。本公司生产的Ar.Qual化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒（卡那霉素抗性）检测，转化效率>104cfu/μg DNA。
常规操作方法
1.取-80℃保存的Ar.qual发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA（转化效率较高，第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量），用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀，依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3.冰浴中拿出放室温，加入700μl 无抗生素的TY液体培养基，于28℃振荡培养2小时。
4.6000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天。
● 农杆菌相关抗生素配方：
| 抗生素 | 配方 | 原液 | 工作液 |
| 羧苄青霉素 (carb) | 双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌 | 50 mg/ml | 50 μg/ml |
| 硫酸卡那霉素(kan) | 双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌 | 50 mg/ml | 50 μg/ml |
| 链霉素 (strep) | 双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌 | 10 mg/ml | 50 μg/ml |
| 利福平 (rif) | DMSO溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌 | 10 mg/ml | 20 μg/ml |
| 庆大霉素 (gent) | 双蒸水溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌 | 20 mg/ml | 40 μg/ml |
| 氯霉素（cam） | 无水乙醇溶解，0.22 μm滤膜过滤除菌 | 34 mg/ml | 34 ug/ml |
常用农杆菌抗性： (R：抗；S：敏感。)
| 农杆菌菌株 | 羧苄青霉素(carb) | 链霉素(strep) | 利福平(rif) | 氯霉素(cam) | 硫酸卡那霉素(kan) |
| Ar.A4 | S | S | S | S | R |
| MSU440 | S | R | S | S | S |
| Ar.Qual | S | R | S | R | S |
| C58C1 | S | R | R | S | S |
| ATCC15834 | S | S | S | S | S |
| K599 | S | R | S | S | S |
| Ar.1193 | R | R | R | S | S |
● TY配方（1L）：
Tryptone 5g
Yeast extract 3g
补水到1L体积，完全溶解后，121度、20分钟高温灭菌配制1M的氯化钙水溶液，121度、20分钟高温灭菌每1L 灭菌的TY液体营养液中加入10ml 无菌的1M氯化钙水溶液即可。
若配制TY固体培养基，则加入15g 琼脂粉。
注意事项
1.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2.混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀，务必使质粒快速、均匀分散开，与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3.平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量或降低涂板的菌量。
4.Ar.Qual具有链霉素、氯霉素抗性，不可用于具有链霉素抗性或氯霉素抗性质粒的转化。
