BIOTOPO KAN 克隆试剂盒利用痘苗病毒的拓扑异构酶I(Topoisomerase I)的切割再连接的特点将片段克隆到载体中。不仅适用于克隆由Pfu、KOD、BioGold SF(Super-Fidelity)Pfu、Phusion和Q5等高保真DNA聚合酶扩增的平末端PCR产物，也可克隆由Taq、Tth和klenTaq等DNA聚合酶扩增的带A尾的PCR产物。试剂盒中的BIOTOPO KAN 载体为线性化的质粒。可以用引物M13F和M13R进行菌落PCR鉴定阳性克隆。