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CR401-BioGold Script Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (+gDNA wiper)

CR401-BioGold Script Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (+gDNA wiper)

 
产品货号 产品名称 规格 价格
CR401-01 BioGold  Script Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (+gDNA wiper) 10 rxns 200.00 
CR401-02 100 rxns 1300.00 
保存温度:-20℃保存24个月

产品描述:

第一链cDNA合成预混液是以mRNA或者总RNA为模板,高效合成第一链cDNA。本产品含有反转录反应所需的全部试剂BioGold Script Plus Reverse TranscriptaseRNase Inhibitor Oligo(dT)18Random N6dNTPs。反应时只需要加入RNA模板和水即可,操作简单,降低操作过程中的污染。本制品含有去基因组成分gDNA wiperRNA为模板进行cDNA第一链合成时,可以同步去除基因组DNA污染,反应结束后,75℃加热5分钟,就可以失活反转录酶,RNA酶抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR 或荧光定量PCR的模板,第二cDNA的合成或线性RNA扩增,也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。

产品特点:

  •  本制品采用耐高温逆转录酶,大幅提高热稳定性和cDNA成效率;
  •  本制品中添加的BioGold ScriptPlus Reverse Transcriptase RNase H活性,可避免第一链cDNA合成过程中,RNA/DNA杂交模板链中RNA降解,保证cDNA合成的质量;
  •  本制品中Random N6Oligo(dT)18引物比例经过优化,可均匀合成样品中的cDNA
  •  本制品中含有去基因组成分,反转录时可同步去除基因组DNA 污染。
产品组分:
产品组成 CR401-01 CR401-02
2×BioGold Script Plus 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix 100μl 1ml
gDNA wiper 10μl 100μl
RNase Free Water 200μl 1ml×2
注意事项:
  1. DEPC 处理实验用到的所有实验器材,或者购买已经证明无核酸酶的实验用具,实验过程戴手套并经常更换手套,避免RNA酶的污染。
  2. 确保所用试剂中无RNA 酶污染。
  1. 试剂要严格密封保存。在反转录过程中,所有管子要确保扣严。
  2. 纯化过的 RNA 必须保证不含有盐,金属离子, 乙醇和苯酚,以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA 的方法去除掉痕量污染物。
  3. 为保证反转录反应的有效进行,需使用高质量RNA模板。
  4. 实验结果显示,最快逆转录速度可达2kb/min 需要提高反转录效率或模板含量较低时可以适当延长反转录时间。
  5. 反应体系配制时请于超净工作台内进行,配制过程中请使用干净灭菌枪头、反应管,条件容许的实验室推荐使用专用的移液枪,避免污染。推荐使用带滤芯的盒装枪头。

操作方法:

  1. 第一链 cDNA 合成
试剂融化后,各组分混匀稍微离心后置于冰上。

3)75℃孵育 5min,终止反应。
反应产物可直接用于 PCR,如果不立即使用,-20°C 保存,长时间保存建议-70°C 放置。
注: RNA 浓度较高或目标基因属高拷贝基因时,可将去基因组和逆转录合为一步操作,更省时省力。所有组分加到一起,50孵育 15-30min,最后 75℃孵育 5min 终止反应即可。